一般來說,紫外光分光光度計(jì)分為單光束和雙光束兩類。顧名思義,單光束型主要是依賴單束光進(jìn)行測(cè)量。一束給定波長(zhǎng)的光通過對(duì)照物,然后再通過實(shí)際樣品溶液,就能得到吸光結(jié)果。雙光束型則是通過一個(gè)斬光輪(mirroredchopperwheel)將一束光分成兩束,分別測(cè)量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品??梢暂^小化光漂移(lampdrift)和減少測(cè)量時(shí)間。一些雙光型光度計(jì)不利用斬光輪,而是利用一種光束分光器來代替,將一束光分成兩束平行的光然后同時(shí)測(cè)量對(duì)照樣品和目的樣品。因?yàn)樵黾恿藴y(cè)量的速度,所以雙光束分光光度計(jì)在測(cè)量一些溶液隨時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的研究中大有用處。使用紫外-可見分光光度計(jì)測(cè)試過程中,若某一光源不用,可選擇將其關(guān)閉,以延長(zhǎng)燈的使用壽命。北京分光分光光度計(jì)教程
紫外可見分光光度計(jì)是分析測(cè)試實(shí)驗(yàn)室里常見的一種分析實(shí)驗(yàn)室儀器,屬于光學(xué)儀器的一種可普遍應(yīng)用于醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工、環(huán)保、地質(zhì)、機(jī)械、冶金、石油、食品、生物、材料、計(jì)量科學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學(xué)等各個(gè)方面,用來進(jìn)行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定、反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究等。世界首臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)誕生于1918年的美國國家標(biāo)準(zhǔn)局,后來紫外可見分光光度計(jì)經(jīng)不斷改進(jìn),又出現(xiàn)自動(dòng)記錄、自動(dòng)打印、數(shù)字顯示、微機(jī)控制等各種類型的儀器,使光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷提高,其應(yīng)用范圍也在不斷擴(kuò)大。重慶元析分光光度計(jì)操作建議定期開機(jī)確保紫外-可見分光光度計(jì)能正常運(yùn)轉(zhuǎn)。
光度計(jì)的原理光度計(jì)的原理基于光的電磁性質(zhì),通過測(cè)量光的強(qiáng)度來獲得光的亮度信息。光度計(jì)通常由光源、光學(xué)系統(tǒng)、探測(cè)器和信號(hào)處理器等組成。光源是產(chǎn)生光的裝置,可以是白熾燈、激光器、LED等。光源的選擇取決于測(cè)量的需求,例如需要測(cè)量特定波長(zhǎng)的光線,則需要選擇相應(yīng)波長(zhǎng)的光源。光學(xué)系統(tǒng)用于收集和聚焦光線,通常包括透鏡、反射鏡等光學(xué)元件。光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和性能直接影響到光度計(jì)的測(cè)量精度和靈敏度。探測(cè)器是用于測(cè)量光的強(qiáng)度的裝置,常見的探測(cè)器有光電二極管(Photodiode)、光電倍增管(PhotomultiplierTube)等。探測(cè)器將光轉(zhuǎn)化為電信號(hào),并輸出給信號(hào)處理器進(jìn)行處理。信號(hào)處理器對(duì)探測(cè)器輸出的電信號(hào)進(jìn)行放大、濾波、數(shù)字化等處理,得到光的強(qiáng)度信息。信號(hào)處理器的性能決定了光度計(jì)的測(cè)量精度和速度。
由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,對(duì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時(shí)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。透射比(吸光度)準(zhǔn)確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。雜散光雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的。注意紫外-可見分光光度計(jì)的日常維護(hù)。
WFZ800-DA、756型等分光光度計(jì),由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測(cè)微弱光電信號(hào),而不能用來檢測(cè)強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號(hào)漂移,靈敏度下降。針對(duì)其上述特點(diǎn),在維修、使用此類儀器時(shí)應(yīng)注意不讓光電倍增管長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,因此在預(yù)熱時(shí),應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長(zhǎng)時(shí)間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,否則將使測(cè)試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測(cè)試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下:分別向被測(cè)的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長(zhǎng)處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個(gè)池的透射比值調(diào)至100%,測(cè)量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在,若超出此范圍應(yīng)考慮其對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。分光光度計(jì)可以測(cè)量可見光、紫外線和紅外線的吸收。新疆火焰分光分光光度計(jì)操作
常見的紫外-可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)范圍為190-1100 nm。北京分光分光光度計(jì)教程
雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測(cè)器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。使用與維護(hù):1、若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng),需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。2、指針式儀器在未接通電源時(shí),電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。3、比色皿使用完畢后,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。4、操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈。北京分光分光光度計(jì)教程