穩(wěn)定轉染細胞的篩選:1、轉染48 h后,用含適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時的殺傷效果較好。但細胞過于稠密,其效率會降低,較好將細胞稀釋至豐度低于25%。2、每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。3、篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間(取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果)。4、挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。5、后續(xù)更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。每種細胞對G418的敏感性不同,一般變動在100ug/ml~1000ug/ml范圍。尿葡萄糖定性檢測試劑盒(改良班氏法)
配制ph計的3mol/L的KCL溶液 ph計的ph電極在使用前都是被護套里的保護液保護著,是為了保持其原有的ph電勢平衡不變,為了測量時會更加精確。這里面就是PH電極的保護液,即 3mol/L的KCL溶液。所以要自己學會如何配置,使ph電極浸泡在保護液里,這樣就能快速回復其活性,又能很好的測量了。配制ph計保護液——3mol/L的KCL溶液步驟: 1、計算:KCL摩爾質量74.5g/moL, 則KCL質量=3mol×74.5g/mol=223.5g; 2、 稱量:用分析天平稱量KCL=223.5g,注意分析天平的使用; 3、 溶解:在燒杯中用100ml蒸餾水使之完全溶解,并用玻璃棒攪拌; 4、 轉移,洗滌:把溶解好的溶液移入1000ml容量瓶,用容量瓶瓶口較細的。抗體儲存液檢測試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。
PCR檢測試劑盒簡介:耐熱聚合酶PCR技術為綜合了兩項技術的實用性極強的DNA體外復制技術.1、DNA模板與引物間的熱變性與復性技術;實現(xiàn)在成千上萬的DNA序列中尋找鎖定目標片段位置。2、耐熱DNA聚合酶技術;實現(xiàn)耐受高溫并對鎖定位置的DNA的快速準確的聚合。為了滿足教學和科研的要求,本公司為您提供了可以擴增特定大小產(chǎn)物的PCR反應檢測試劑盒。包括500bp~1000bp大小的PCR產(chǎn)物。本檢測試劑盒含有完成PCR反應的全部試劑。提供清晰準確的PCR擴增效果,確保實驗順利進行。該反應體系中Taq DNA聚合酶的*延伸溫度為70~75℃。Taq酶的延伸速度為1~2 kb/min。
檢測檢測試劑盒操作步驟:標準品的稀釋:本檢測試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。固體試劑的取用:取固體量較多時用大匙,較少時用小匙。
氨芐青霉素是一種β-內酰胺類,干擾肽聚糖的交聯(lián)從而克制細菌細胞壁的合成,屬于氨基青霉素類。氨芐青霉素時常被用于分子生物學實驗研究中,如用于配制含氨芐青霉素的LB培養(yǎng)基或LB平板等。氨芐青霉素溶液由氨芐青霉素溶于水組成,經(jīng)0.22μm過濾除菌,可以直接添加到培養(yǎng)基中。一般工作濃度為50~100μg/ml,其中嚴緊型質粒常采用20μg/ml,松弛型質粒常采用60μg/ml。使用方法:根據(jù)實驗具體要求操作,一般Amp在LB中終濃度為50~100μg/ml??梢园凑?/1000 LB體積加入100mg/ml Amp溶液,如100ml LB中加入100μl Amp 100mg/ml。注意事項:1、盡注意無菌操作,避免污染。2、避免反復凍融。3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。標準物質在方法確認中的主要作用是評估方法的正確度(偏差)及其測量不確定性。小鼠人工腦脊液
檢測試劑盒變質的原因:樣本因素。尿葡萄糖定性檢測試劑盒(改良班氏法)
標準物質取樣方式:在均勻性檢驗的取樣時,應從待定特性量值可能出現(xiàn)差異的部位抽取,取樣點的分布對于總體樣品應有足夠的代表性,例如對份狀物質應在不同部位取樣;對圓棒狀材料可在兩端和棒長的1/4、1/2、3/4部位取樣,在同一斷面可沿直徑取樣。對溶液可在分裝的初始,中間和終結階段取樣。當引起待定特性量值的差異原因未知或認為不存在差異時,則進行隨機取樣??刹捎秒S機數(shù)表決定抽取樣品的號碼。對具有多種待定的特性量值的標準物質,應選擇有代表性的和不容易均勻的待側特性量值進行均勻性檢驗。尿葡萄糖定性檢測試劑盒(改良班氏法)