DMEM 培養(yǎng)基成分復(fù)雜且精妙,除了富含氨基酸、維生素、葡萄糖、等主要成分外,還包含多種無(wú)機(jī)鹽。這些無(wú)機(jī)鹽在維持細(xì)胞內(nèi)外滲透壓平衡方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用,確保細(xì)胞不會(huì)因滲透壓異常而出現(xiàn)失水皺縮或吸水膨脹等情況,維持細(xì)胞正常形態(tài)。同時(shí),無(wú)機(jī)鹽中的離子,如鈣離子、鎂離子等,參與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程,影響細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和代謝等生理活動(dòng),為細(xì)胞的生命活動(dòng)提供穩(wěn)定的離子環(huán)境,與其他營(yíng)養(yǎng)成分協(xié)同作用,共同促進(jìn)細(xì)胞的健康生長(zhǎng)。Ham’s F-12常作為無(wú)血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液,添加血清后也廣泛應(yīng)用于ai細(xì)胞和原代細(xì)胞的培養(yǎng)。河南正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商家
基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)研究離不開(kāi) DMEM 培養(yǎng)基的支持。科研人員借助 DMEM 培養(yǎng)基,能夠在體外成功培養(yǎng)和長(zhǎng)期維持多種細(xì)胞系,深入探究細(xì)胞的各項(xiàng)功能。例如,通過(guò)觀察細(xì)胞在 DMEM 培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)、增殖過(guò)程,研究細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制;分析細(xì)胞的分化現(xiàn)象,探索細(xì)胞命運(yùn)決定的分子機(jī)理;監(jiān)測(cè)細(xì)胞的死亡過(guò)程,了解細(xì)胞凋亡、壞死等不同死亡方式的信號(hào)通路。DMEM 培養(yǎng)基為解開(kāi)細(xì)胞生命奧秘提供了關(guān)鍵的研究工具,助力基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)研究不斷取得新突破。四川醫(yī)療細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商家MCDB 131培養(yǎng)基除用于內(nèi)皮細(xì)胞外,還可用于其它細(xì)胞類型,如肝細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞等。
1.細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,參與細(xì)胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強(qiáng),適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來(lái)自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點(diǎn)是營(yíng)養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜,來(lái)源受限且制作過(guò)程復(fù)雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。
可在血清含量低時(shí)用,適用于克隆化培養(yǎng)。F12適用于CHO細(xì)胞,也是無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營(yíng)養(yǎng)成份豐富,血清使用量也減少。常作為開(kāi)發(fā)無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無(wú)法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,細(xì)胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時(shí)必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清,這樣才能維持細(xì)胞活力,促進(jìn)細(xì)胞增殖。針對(duì)不同的動(dòng)物細(xì)胞,現(xiàn)已開(kāi)發(fā)了多種商業(yè)化、個(gè)性化的低血清細(xì)胞培養(yǎng)基配方,營(yíng)養(yǎng)成份更加豐富,血清使用量可降低至1~3%,由此可減少了血清等動(dòng)物來(lái)源成份對(duì)生物制品安全性的影響。無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基(serumfreemedium,SFM)經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無(wú)血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢(shì)。采用無(wú)血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡(jiǎn)化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無(wú)血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達(dá)到既能滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來(lái)問(wèn)題的目的。MCDB131是MCDB培養(yǎng)基的一種,是由Knedler和Ham設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)出來(lái)的,初用于培養(yǎng)人微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HMVEC)。
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時(shí)還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來(lái)又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長(zhǎng)時(shí)間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動(dòng)較大對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響??捎糜跓o(wú)CO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,**適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn),研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時(shí)(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測(cè)。此外,一些無(wú)血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡。 針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的MCDB改良培養(yǎng)基。黑龍江醫(yī)療細(xì)胞培養(yǎng)基源頭廠家
添加HEPES的培養(yǎng)基能較長(zhǎng)時(shí)間保持恒定的PH范圍,可有效的防止培養(yǎng)液PH波動(dòng)較大對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響。河南正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商家
任意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,簡(jiǎn)便快捷。高糖型培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于生長(zhǎng)快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒寄主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如運(yùn)用CHO細(xì)胞表述EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適宜代謝效用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的海洋生物緩沖劑,對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性效用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長(zhǎng)時(shí)間維持恒定的PH范圍,可以有效性的以防培養(yǎng)液PH波動(dòng)較大對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生不利于的影響。可用于無(wú)CO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,**適宜細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些弱點(diǎn),研究說(shuō)明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的功用,因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時(shí)(如乳腺組織),**好用到不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測(cè)。此外,一些無(wú)血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀抵消。青霉素-鏈霉素混合液一般而言也被稱做“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為防止微生物污染**常用的***,其中,青霉素能夠擾亂細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,對(duì)革蘭陽(yáng)性菌特別有效性。河南正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商家
深圳市華晨陽(yáng)科技有限公司是一家致力于核酸檢測(cè)、分子診斷、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、病毒檢測(cè)等產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體的國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)。公司擁有二十多項(xiàng)專利,部分專利已經(jīng)轉(zhuǎn)化應(yīng)用于市場(chǎng)。產(chǎn)品主要應(yīng)用于基因檢測(cè)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、生物制藥、大型甲等醫(yī)院、出入境檢驗(yàn)檢疫、診斷試劑、疾控機(jī)構(gòu)、刑偵法醫(yī)鑒定等。近年來(lái),公司不斷加大自主研發(fā)投入,積極引進(jìn)人才和技術(shù),并與國(guó)內(nèi)外多家科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所以及三甲醫(yī)院、基因檢測(cè)公司、疾病預(yù)防控制中心等科研機(jī)構(gòu)有著緊密合作,促進(jìn)人類健康產(chǎn)業(yè)大發(fā)展。