外泌體參與了機體不同的生理和病理過程,并對細胞活動發(fā)揮重要的調(diào)控作用,如免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、**侵襲等。且外泌體具有細胞類型特異性,即不同細胞分泌的外泌體的組成成分和功能不同,這使得外泌體具有成為多種疾病早期診斷標志物的潛力。此外,外泌體在作為基因和藥物運載、**和**生物學等方面也已經(jīng)成為研究熱點。外泌體存在于人類或動物的各種體液中,如細胞培養(yǎng)上清、血液、尿液等,我們可以選擇不同的樣本來源進行相關的外泌體研究。不同的實驗樣本采集時需要注意的地方不一樣,如細胞培養(yǎng)上清在收集樣本前需換成無外泌體血清或者無血清培養(yǎng)基培養(yǎng),以降低背景值的干擾。如果選擇一家靠譜的外泌體檢測服務公司。西藏推薦的外泌體測序
外泌體的分離與鑒定技術是研究和應用的關鍵步驟,目前常用方法包括超速離心、密度梯度離心、免疫親和捕獲、聚合物沉淀等。其中超速離心法是**經(jīng)典也是使用**廣的方法,能夠較好地富集外泌體,但操作復雜、時間長,且容易混雜微囊泡或細胞碎片。近年來,基于商業(yè)試劑盒的聚合物沉淀法由于操作便捷、效率較高,也***用于臨床樣本的初篩研究。而為了提高純度和特異性,免疫磁珠捕獲法結合外泌體特異性表面蛋白(如CD63、CD81等)逐漸成為高通量檢測的重要手段。外泌體的鑒定通常需要借助透射電鏡(TEM)、納米顆粒跟蹤分析(NTA)和Westernblot等方法綜合判斷。青海推薦的外泌體提取外泌體檢測服務,醫(yī)學實驗,醫(yī)學模型構建。
外泌體在免疫系統(tǒng)中的作用復雜且多樣,不同來源的外泌體可能具有截然不同的免疫調(diào)控效應。例如,樹突狀細胞分泌的外泌體可以呈遞抗原并***T細胞,具有促進免疫反應的作用;而**來源的外泌體則可能通過表達PD-L1等分子抑制T細胞活性,從而實現(xiàn)免疫逃逸。此外,干細胞來源的外泌體(如間充質(zhì)干細胞外泌體)也常被發(fā)現(xiàn)具有***、免疫抑制特性,廣泛應用于自身免疫病、***移植等領域的研究。這些現(xiàn)象提示我們,在考慮外泌體應用時,必須關注其來源細胞類型及所處的生理狀態(tài),才能準確預測其免疫調(diào)節(jié)方向。
在**生物學中,外泌體被認為是腫瘤細胞“遙控”微環(huán)境和遠程***的重要工具。許多研究表明,**來源的外泌體含有多種促*分子,如VEGF、TGF-β、miR-21等,可以促進血管新生、免疫逃逸和**轉(zhuǎn)移。例如,乳腺*細胞釋放的外泌體可促進肺部前轉(zhuǎn)移微環(huán)境的形成,為腫瘤細胞遷移提供“土壤”。此外,**外泌體還能調(diào)控巨噬細胞、T細胞和樹突狀細胞的功能,抑制免疫應答,從而幫助**免于被***。這種功能使外泌體在腫瘤免疫***中的研究越來越受到關注,部分研究嘗試通過抑制外泌體分泌或***循環(huán)外泌體,阻斷其促*作用。外泌體檢測服務|外泌體檢測服務|科研課題外包|實驗外包服務。
外泌體提取之后利用電鏡來分析其大小和形態(tài),利用流式細胞儀來分析細胞表面標記,通過Western blot和ELISA等方法對蛋白進行分析,或通過qPCR和新一代測序(NGS)來分析RNA。調(diào)查發(fā)現(xiàn),在分離exosome時,約有56%的人采用超速離心法,說明這種方法仍是目前的金標準方法。不過這種方法缺點也不少:耗時耗力,往往需要8-30個小時;每次比較多只能處理6個樣品;需要大量的起始材料;產(chǎn)量不高。商業(yè)化的exosome提取試劑盒已經(jīng)上市,更為簡單省事。外泌體檢測服務、細胞實驗外包,靠譜專業(yè)的實驗外包平臺。西藏推薦的外泌體測序
外泌體存在于人類或動物的各種體液中。西藏推薦的外泌體測序
外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合,有文獻報道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?,F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63, CD81 和CD9))、熱休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33(結腸上皮細胞來源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源)、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素(不成熟的樹突狀細胞)。西藏推薦的外泌體測序